El papel de las células mioepiteliales en el carcinoma de mama canino

Los tumores de mama son las neoplasias más frecuentes en las hembras de la especie canina y la participación de las células mioepiteliales (ME) en su constitución es muy alta. Algunas de las investigaciones realizadas en el carcinoma de mama humano mediante métodos inmunohistoquímicos y cultivos de células ME purificadas indican que estas células podrían tener funciones supresoras de tumor. En este trabajo hemos analizado el papel de las células ME en la invasión estromal del carcinoma de mama y hemos estandarizado los métodos de aislamiento, purificación y cultivo de células ME caninas. La integridad de la capa de células ME alrededor de grupos de células epiteliales atípicas se valoró en cortes de tejido de tumores benignos y malignos y se correlacionó con el grado de malignidad y el índice de proliferación de las lesiones, observándose que el nivel de expresión de calponina, el marcador utilizado para identificar dicha capa, era similar en los tumores benignos y los malignos de grados histológicos 1 y 2. Estos hallazgos indican que las células ME no son buenos marcadores de invasión para el diagnóstico del carcinoma in situ de la mama canina, pero sí sugieren la existencia de un efecto protector sobre la progresión de la enfermedad. El aislamiento y purificación de las células ME requiere el uso de marcadores de superficie específicos de las células ME de la mama canina no identificados previamente. La expresión de CD10 y del antígeno de timocitos Thy1, identificados recientemente como marcadores sensibles y específicos de la membrana de las células ME en la mama humana, se analizó mediante técnicas inmunohistoquímicas en células de inmunofenotipo ME y epitelial de la glándula mamaria normal y neoplásica canina. El CD10, al igual que la mayoría de los marcadores conocidos de las células ME de la mama canina, demostró ser sensible pero no específico, mientras que el Thy1 marcó células ME exclusivamente. Finalmente, se aislaron y purificaron las células ME de mamas normales y neoplásicas caninas utilizando un método inmunomagnético (MACS) y el marcador Thy1. Los resultados de este estudio demostraron la posibilidad de aislamiento y cultivo de células ME caninas por primera vez en la literatura para así poder estudiar in vitro su papel en el desarrollo de los tumores de la mama caninaMammary tumours are the most common neoplasms in female dogs and the participation of the myoepithelial (ME) cells in its constitution is very high. Some immunohistochemical and in vitro studies of human breast cancer suggest that these cells have tumour suppressor functions. In these studies, the role of ME cells in the stromal invasion of canine mammary carcinoma and the isolation, purification and culture methods of canine ME cells have been analyzed and standardized, respectively. The integrity of the ME cell layer around groups of atypical epithelial cells was evaluated in tissue samples of benign and malignant tumours and its correlation with the histological grade of malignancy and proliferation index of the lesions were analyzed. Results showed that the level of expression of calponin, the marker used to identify this layer, was similar in benign and malignant tumours of histological grades 1 and 2. These findings indicated that ME cells were not good marker of invasion to diagnose in situ carcinoma of the canine mammary gland. On the contrary, they suggest a potential protective on the progression of the disease. Isolation and purification of ME cells requires the use of non-available specific surface markers of ME cells of the canine mammary gland. The expression of CD10 antigen and Thy1 (thymocyte differentiation antigen), both considered to be sensitive and specific surface markers of human breast ME cells, were analyzed by immunohistochemistry in ME cell and epithelial cell immunophenotypes of the normal and neoplastic canine mammary gland. CD10, as the majority of canine ME cell marker, proved to be sensitive but not specific, whereas Thy1 marked ME cells exclusively. Finally, ME cells from normal and neoplastic canine mammary gland were isolated and purified using an immunomagnetic method (MACS) and Thy1 marker. The results of this study showed the possibility of isolation and culture of canine ME cells for first time in literature opening this way the possibility of studying in vitro their role in the development of canine mammary tumours with novel and powerful techniques

IMPLEMENTACIÓN DE ESTRATEGIAS CURRICULARES EN LA FORMACIÓN DEL PROFESIONAL EN CIENCIAS PEDAGÓGICAS (Revisión)

This article deals with the major theoretical methodological guidelines for the treatment of the crosscurricular syllabi which embody a new perspective to yhe features of the process of professional formation and are related to these general aims which are not likely to reach with the required level of depth and mastery departing from the contents of a single discipline and demand the additional support of the rest crssing the whole curriculum based on the theoretical, methodological, and practical guidelines aimed at orienting the transcendental changes in forming the professionals of the major Pedagogy – Psychology, so that they can master legal standards having to do with the object of their profession and the ways of acting they should develop in order to transform their living reality as an outcome of their mastery and acting with sound motivation and responsibility  from the contents of their profession.  El presente artículo refiere las bases teóricas metodológicas fundamentales para el tratamiento de las estrategias curriculares, que incorporan una nueva perspectiva a las características del proceso de formación profesional, y  están relacionadas con aquellos objetivos generales que no es posible alcanzar, con el nivel de profundidad y dominio requeridos, desde el contenido de una sola disciplina y demandan el concurso adicional de las restantes, atravesando todo el currículo desde los lineamientos teóricos, metodológicos y prácticos, con el propósito de orientar las transformaciones trascendentales en la formación del profesional de Pedagogía – Psicología que les permita el dominio de las normativas jurídicas relacionadas con el objeto de su profesión y los modos de actuación que deben desarrollar para transformar la realidad en que vive, a partir de dominar y actuar en consecuencia con una profunda motivación y responsabilidad desde el contenido de su profesión

A Gene-alteration Profile of Human Lung Cancer Cell Lines

Aberrant proteins encoded from genes altered in tumors drive cancer development and may also be therapeutic targets. Here we derived a comprehensive gene-alteration profile of lung cancer cell lines. We tested 17 genes in a panel of 88 lung cancer cell lines and found the rates of alteration to be higher than previously thought. Nearly all cells feature inactivation at TP53 and CDKN2A or RB1, whereas BRAF, MET, ERBB2, and NRAS alterations were infrequent. A preferential accumulation of alterations an-tong histopathological types and a mutually exclusive occurrence of alterations of CDKN2A and RB1 as well as of KRAS, epidermal growth factor receptor (EGFR), NRAS, and ERBB2 were seen. Moreover, in non-small-cell lung cancer (NSCLC), concomitant activation of signal transduction pathways known to converge in mammalian target of rapamycin (mTOR) was common. Cells with single activation of ERBB2, PTEN, or MET signaling showed greater sensitivity to cell growth inhibition induced by erlotinib, LY294002, and PHA665752, respectively, than did cells featuring simultaneous activation of these pathways, underlining the need for combined therapeutic strategies in targeted cancer treatments. In conclusion, our gene,alteration landscape of lung cancer cell lines provides insights into how gene alterations accumulate and biological pathways interact in cancer. Hum Mutat 30, 1199-1206, 2009. (C) 2009 Wiley-Liss, Inc

Progesterone receptor isoform A may regulate the effects of neoadjuvant aglepristone in canine mammary carcinoma

Background: Progesterone receptors play a key role in the development of canine mammary tumours, and recent research has focussed on their possible value as therapeutic targets using antiprogestins. Cloning and sequencing of the progesterone receptor gene has shown that the receptor has two isoforms, A and B, transcribed from a single gene. Experimental studies in human breast cancer suggest that the differential expression of progesterone receptor isoforms has implications for hormone therapy responsiveness. This study examined the effects of the antiprogestin aglepristone on cell proliferation and mRNA expression of progesterone receptor isoforms A and B in mammary carcinomas in dogs treated with 20 mg/Kg of aglepristone (n = 22) or vehicle (n = 5) twice before surgery. Results: Formalin-fixed, paraffin-embedded tissue samples taken before and after treatment were used to analyse total progesterone receptor and both isoforms by RT-qPCR and Ki67 antigen labelling. Both total progesterone receptor and isoform A mRNA expression levels decreased after treatment with aglepristone. Furthermore, a significant decrease in the proliferation index (percentage of Ki67-labelled cells) was observed in progesterone-receptor positive and isoform-A positive tumours in aglepristone-treated dogs. Conclusions: These findings suggest that the antiproliferative effects of aglepristone in canine mammary carcinomas are mediated by progesterone receptor isoform A

Use of algorithms for the differential diagnosis of digestive and respiratory infectious disorders of pigs

La utilidad de los algoritmos en las especialidades médicas ha sido ampliamente documentada, aunque su empleo en sanidad animal resulta poco frecuente. Para este estudio se ha creado un algoritmo que incluyó el diagnóstico diferencial de los procesos infecciosos respiratorios y digestivos en la especie porcina. A continuación, se realizó una práctica con alumnos de tercer curso del Grado en Veterinaria de la asignatura “Enfermedades Infecciosas”, a los que se les ha facilitado información y la posibilidad de solicitar hasta cuatro pruebas diagnósticas laboratoriales para identificar correctamente el agente etiológico. Tras un período para la resolución del caso, en la que solo algunos grupos identificaron correctamente la enfermedad, se les facilitó el algoritmo, lo que permitió que todos los alumnos acertaran el diagnóstico. Finalizada la práctica, a los alumnos se les pasó una encuesta acerca de su experiencia con los algoritmos y su grado de satisfacción. El uso de algoritmos ha demostrado ser útil para la resolución de casos en la asignatura de enfermedades infecciosas según el 100% de los alumnos, habiendo un 96,9% de los mismos que los consideran útiles en el ámbito profesional. La práctica ha sido evaluada con un elevado grado de satisfacción (8,72 de media).The use of algorithms in medical specialties has been well documented. However, its use in animal health is not frequent. For this study, an algorithm on differential diagnosis of porcine infectious digestive and respiratory disorders has been designed. Then, a practice was carried out with third year students of the Degree in Veterinary Science enrolled in the subject "Infectious Diseases". During this practice, information on the outbreak was provided to the students, which had the possibility to request until four laboratory tests in order to identify the etiological agent. After a time for the resolution of the case, in which only some groups determined correctly the cause of the outbreak, the algorithm was provided to the students, which allowed to all of them the correct diagnosis of the disorder. After the practice, the students made a survey about their experience with the algorithms and their satisfaction degree. The use of algorithms was useful for the resolution of cases in the subject of infectious diseases according to 100% of the students, with 96.9% of them considering them useful in the professional work. The practice has been evaluated with a high degree of satisfaction (8.72 on average)

Investigación metodológica y coordinación vertical en las asignaturas del área de construcción en el grado de arquitectura técnica

El trabajo desarrollado consiste en la implantación de una metodología docente basada en la necesidad de coordinación de las asignaturas de construcción. La práctica profesional del Arquitecto Técnico obliga a la planificación estructural en función de la tipología de elementos no estructurales que componen la edificación. Por ello, se ha considerado necesaria la coordinación de ambas disciplinas. Para llevarla a cabo, se ha desarrollado esta metodología docente en las asignaturas de Construcción de Elementos Estructurales y Construcción de elementos no Estructurales, que se imparten en el grado en Arquitectura Técnica. En ambas asignaturas, durante los últimos cursos, se ha trabajado con imágenes en dos y tres dimensiones, pero en esta ocasión se pretende que exista una coordinación entre las soluciones constructivas estructurales y no estructurales. Para ello se ha planteado la necesidad de que los estudiantes se enfrenten a la resolución de detalles constructivos, con una perspectiva tridimensional que es considerada necesaria para entender la interacción de los elementos en las obras de edificación. Para llevar a cabo esta nueva experiencia, los estudiantes han solucionado detalles constructivos complejos y han defendido la solución adoptada exponiendo sus trabajos en el aula y en las zonas comunes del edificio EPS IV

Impact of SARS-CoV-2 RNAemia and other risk factors on long-COVID: A prospective observational multicentre cohort study

As the COVID-19 pandemic has progressed, long-COVID has emerged as a major problem that poses a significant challenge for attending physicians and health care policy makers. Therefore, we read with much interest the recently published unicentre study in the Journal of Infection by Righi et al.,1 carried out on 465 adult COVID-19 patients (235 [50.5%] hospital-admitted) followed-up during nine months, concluding that those with advanced age, intensive care unit (ICU) admission, and multiple symptoms at onset were more likely to have long-term COVID-19 symptoms, with negative impact on physical and mental wellbeing. Other studies have found that female gender, age, longer hospital stay, pre-existing hypertension, cardiovascular disease, diabetes, chronic obstructive pulmonary disease, smoking, obesity, and chronic alcoholism increase the likelihood of long-COVID.2,3 It is known that SARS-CoV-2 RNAemia is a predictor of COVID-19 severity and in-hospital complications.4,5 However, to the best of our knowledge, only two studies have assessed, up to one or three months after the acute COVID-19 onset, whether SARS-CoV-2 RNAemia may have an impact on long-COVID,6,7 both finding that RNAemia at presentation might predict the persistence of symptoms. However, these studies did not provide information regarding long-COVID symptoms nor the association with SARS-CoV-2 RNAemia beyond three months, and could not differentiate between “true” long-COVID and the convalescence phase of the SARS-CoV-2 infection.A.R. has received a predoctoral research grant from the Instituto de Salud Carlos III, Spanish Ministry of Science, Innovation and Universities, (PFIS grant FI18/00183). G.A.A. reports a predoctoral research grant from the 201808-10 project, funded by La Marató de TV3. This study was supported by the Instituto de Salud Carlos III, Subdirección General de Redes y Centros de Investigación Cooperativa, Ministerio de Economía, Industria y Competitividad, the Spanish Network for Research in Infectious Diseases (REIPI, RD16/0016/0001, RD16/0016/0005, RD16/0016/0009, RD16/0016/0013)-co-financed by the European Development Regional Fund, A way to achieve Europe, Operative program Intelligent Growth 2014-2020, and the Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Infecciosas (CIBERINFEC) [CB21/13/00009; CB21/13/00006], Madrid, Spain. J.S.C. and E.C. received grants from the Instituto de Salud Carlos III, Ministerio de Ciencia e Innovación, Proyectos de Investigación sobre el SARS-CoV-2 y la enfermedad COVID-19 (COV20/00580; COV20/00370). J.S.C. is a researcher belonging to the program “Nicolás Monardes” (C-0059–2018), Servicio Andaluz de Salud, Junta de Andalucía, Spain. Samples and data from patients included in this study from the Hospital Universitario Cruces (Bizkaia, Spain) were provided by the Basque Biobank (www.biobancovasco.org) and were processed following standard operation procedures with appropriate approval of the Ethical and Scientific Committees.Peer reviewe

Vigilancia ambiental de Compuestos Disruptores Endocrinos y otros contaminantes prioritarios en el medio acuático mediante técnicas cromatográficas y biológicas

[spa] Los compuestos disruptores endocrinos (EDCs) son sustancias exógenas capaces de alterar las funciones del sistema endocrino y la regulación del desarrollo embrionario, y por consecuencia, con capacidad de provocar efectos adversos sobre la salud de un organismo o su progenie (WHO, 2012). Hay un aumento de preocupación no solo por la presencia de estos compuestos en el medio ambiente, sino por los efectos biológicos que pueden ejercer sobre la salud humana y de animales. Los EDCs pueden ser compuestos naturales y sintéticos Tienen diversos mecanismos de actuación y presentan características propias, de forma que cada EDC tiene una curva Dosis-Respuesta No Monotónica (NMDR) característica, pueden ejercer mayores efectos estrogénicos a dosis muy bajas (low dose), el momento de la exposición a los EDCs es crítico, siendo mayor e irreversible en la fase prenatal, tienen largos periodos de latencia. En los últimos 10 años ha habido muchos avances en su conocimiento y se han relacionado enfermedades tan comunes como la diabetes y la obesidad y hay estudios sobre sus efectos, que pueden manifestarse a lo largo de varias generaciones a través de la epigenética. Son compuestos que entran en el medio acuático principalmente por las descargas de las estaciones depuradoras de aguas residuales y pueden distribuirse en distintos compartimentos, siendo adsorbidos en fangos, sedimentos y material particulado. Las mezclas de EDCs a las que estamos expuestos en el medioambiente pueden presentar efectos sinérgicos, antagónicos, inhibitorios o aditivos. Presentan actividad estrogénica a concentraciones muy bajas (los estrógenos a 1-10 ng/L y los alquilfenoles a g/L). La gran variedad de propiedades físico-químicas de los EDCs y las bajas concentraciones a las que están presentes en el medioambiente, hace que su determinación represente un reto por su complejidad, por lo que se necesita métodos químicos muliresiduo sensibles, así como técnicas biológicas que permitan determinar la actividad estrogénica que presentan a concentraciones muy bajas. Por tanto, ante la actual problemática de la contaminación del agua por compuestos disruptores endocrinos, y la creciente preocupación por los efectos biológicos que pueden tener sobre la salud y el medioambiente, esta tesis responde a la demanda de métodos analíticos para su determinación y control, y a la necesidad de establecer metodologías integradas con técnicas biológicas para la determinación no solo de las bajas concentraciones a las que los EDCs están presentes en el medioambiente acuático, sino también de su actividad estrogénica. Con este objetivo, en esta tesis se ha llevado a cabo la optimización de una metodologías integrada, de cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas para identificar los EDCs en el medio acuático, con análisis confirmatorio de estrógenos mediante LC-MS(MS) y el bioensayo con levaduras recombinantes (RYA) que determina de forma cuantitativa la estrogenicidad total de la muestra, detectando tanto los estrógenos naturales como los xenoestrógenos sin tener en cuenta la identidad de los compuestos químicos responsables de este efecto. Adicionalmente, Se han validado inmunoensayos ELISA para la determinación de compuestos alquilfenólicos en aguas, que permiten realizar un previo screening y analizar un gran número de muestras en menor tiempo y a coste inferior en Programas de Vigilancia Ambiental (PVA) Se han llevado a cabo PVAs en Portugal y en las cuencas de los ríos Llobregat y Ter en Cataluña (Nordeste de España). La actividad estrogénica ha sido atribuida principalmente a los compuesto alquilfenólicos, más ubicuos, mientras que en los puntos en los que se han identificado y confirmado estrógenos mediante LC- MS/MS, éstos compuestos tienen mayor contribución a la estrogenicidad total. Los resultados obtenidos ponen de manifiesto la importancia de analizar la fracción particulada en aguas para determinar la concentración total de compuestos alquilfenólicos, debido a la distribución de los compuestos más estrogénicos (nonilfenol y octilfenol) en el material particulado y la absorción en los fangos. El bioensayo RYA ha detectado una baja actividad estrogénica en las aguas superficiales, mientras que el análisis del PM en aguas residuales ha permitido obtener una mayor eliminación de la estrogenicidad (95- 97%), más importante medioambientalmente las concentraciones químicas por los potenciales efectos que puede producir en la fauna y los seres humanos. Finalmente, el desarrollo de técnicas más avanzadas para la determinación de EDCs, el aumento de publicaciones científicas, y el hecho de que los principales EDCs estudiados en esta tesis (NP, BPA, DEHP, E1, E2, E3) han sido posteriormente incluidos en la normativa europea y de USA de contaminantes prioritarios (D. 2008/105/EC, D. (UE) 2015/495/EC, Reglamento REACH y D. (UE) 2003/53/EC), ponen de manifiesto la relevancia de los compuestos estudiados.[eng] There is growing evidence that some compounds, known as endocrine-disrupting compounds (EDCs), can mimic or antagonize the actions of steroid hormones, affecting the health of humans and wildlife species by disrupting their normal endocrine function. EDCs are natural and synthetic compounds that can be found in the aquatic environment as a result of the chemical industry, pharmacy and household applications. We are exposed to mixtures of EDCs that can exert physiological effects, synergic, antagonist o additive, at very low concentrations (i.e. -estradiol and ethinylestradiol are reported to be estrogenic to fish at levels as low as 0.1 to 10 ng/L). Over the past decade there have been significant advances in our understanding of EDCs, their mechanisms of action and biological effects on human and wildlife health, suggesting a greater role for EDCs in disease than what was predicted. EDCs have Non-Monotonic Dose Response corves, they can exert effects at lower doses than expected, the moment of the exposure is critical, their effects can have latency periods and even pass to other generations. To control the endocrine disruptors, there is a need for monitoring large numbers of samples and for methodologies, not only to identify the EDCs at the low dose that they are present in the environment, but also to assess their estrogenic activity. This thesis responds to increasing concerns on this matter, providing an integrated methodology that combine analytical methods by LC-MS(MS) to determine the presence of EDCs at low concentrations in the environment, as well as biological techniques (Recombinant Yeast Assay, RYA) to assess their estrogenic activity in environmental samples. In addition, ELISA immunoassays have been validated as a screening tool for a rapid and cost-effective detection of alkylphenolic compounds in water samples in monitoring programs. Monitoring programs were performed in Portugal and the Llobregat and Ter River basins in Catalonia, Spain. Estrogenic activity was mainly attributed to alkylphenolic compounds, whereas in a few samples, the estrogens identified and confirmed by LC-MS/MS were responsible for the estrogenicity. The obtained results pointed out the importance to analyze the particulated fraction of waters to determine the total concentration of alkylphenolic compounds, due to partitioning of the most estrogenic (nonylphenol and octylphenol) upon particulate matter (PM) and enrichment in sludge. RYA showed weak estrogenic activity in surface water samples, whereas the analysis of PM in wastewaters permitted to obtain higher removal of estrogenicity (95-97%) than chemical concentrations, more important from the environmental point of view. Finally, due to their estrogenic properties, some of the EDCs studied in this thesis (i.e. Nonylphenol, DEHP, estradiol, ethinylestradiol) have been included in the European regulation (D. 2000/60/EC, D. 2008/105/EC, D. 2015/495/EC, REACH Regulation and D. 2003/53/EC) and in the US EPA priority list, confirming the relevance of the target compounds selected

Vigilancia ambiental de Compuestos Disruptores Endocrinos y otros contaminantes prioritarios en el medio acuático mediante técnicas cromatográficas y biológicas

Los compuestos disruptores endocrinos (EDCs) son sustancias exógenas capaces de alterar las funciones del sistema endocrino y la regulación del desarrollo embrionario, y por consecuencia, con capacidad de provocar efectos adversos sobre la salud de un organismo o su progenie (WHO, 2012). Hay un aumento de preocupación no solo por la presencia de estos compuestos en el medio ambiente, sino por los efectos biológicos que pueden ejercer sobre la salud humana y de animales. Los EDCs pueden ser compuestos naturales y sintéticos Tienen diversos mecanismos de actuación y presentan características propias, de forma que cada EDC tiene una curva Dosis-Respuesta No Monotónica (NMDR) característica, pueden ejercer mayores efectos estrogénicos a dosis muy bajas (low dose), el momento de la exposición a los EDCs es crítico, siendo mayor e irreversible en la fase prenatal, tienen largos periodos de latencia. En los últimos 10 años ha habido muchos avances en su conocimiento y se han relacionado enfermedades tan comunes como la diabetes y la obesidad y hay estudios sobre sus efectos, que pueden manifestarse a lo largo de varias generaciones a través de la epigenética. Son compuestos que entran en el medio acuático principalmente por las descargas de las estaciones depuradoras de aguas residuales y pueden distribuirse en distintos compartimentos, siendo adsorbidos en fangos, sedimentos y material particulado. Las mezclas de EDCs a las que estamos expuestos en el medioambiente pueden presentar efectos sinérgicos, antagónicos, inhibitorios o aditivos. Presentan actividad estrogénica a concentraciones muy bajas (los estrógenos a 1-10 ng/L y los alquilfenoles a g/L). La gran variedad de propiedades físico-químicas de los EDCs y las bajas concentraciones a las que están presentes en el medioambiente, hace que su determinación represente un reto por su complejidad, por lo que se necesita métodos químicos muliresiduo sensibles, así como técnicas biológicas que permitan determinar la actividad estrogénica que presentan a concentraciones muy bajas. Por tanto, ante la actual problemática de la contaminación del agua por compuestos disruptores endocrinos, y la creciente preocupación por los efectos biológicos que pueden tener sobre la salud y el medioambiente, esta tesis responde a la demanda de métodos analíticos para su determinación y control, y a la necesidad de establecer metodologías integradas con técnicas biológicas para la determinación no solo de las bajas concentraciones a las que los EDCs están presentes en el medioambiente acuático, sino también de su actividad estrogénica. Con este objetivo, en esta tesis se ha llevado a cabo la optimización de una metodologías integrada, de cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas para identificar los EDCs en el medio acuático, con análisis confirmatorio de estrógenos mediante LC-MS(MS) y el bioensayo con levaduras recombinantes (RYA) que determina de forma cuantitativa la estrogenicidad total de la muestra, detectando tanto los estrógenos naturales como los xenoestrógenos sin tener en cuenta la identidad de los compuestos químicos responsables de este efecto. Adicionalmente, Se han validado inmunoensayos ELISA para la determinación de compuestos alquilfenólicos en aguas, que permiten realizar un previo screening y analizar un gran número de muestras en menor tiempo y a coste inferior en Programas de Vigilancia Ambiental (PVA) Se han llevado a cabo PVAs en Portugal y en las cuencas de los ríos Llobregat y Ter en Cataluña (Nordeste de España). La actividad estrogénica ha sido atribuida principalmente a los compuesto alquilfenólicos, más ubicuos, mientras que en los puntos en los que se han identificado y confirmado estrógenos mediante LC- MS/MS, éstos compuestos tienen mayor contribución a la estrogenicidad total. Los resultados obtenidos ponen de manifiesto la importancia de analizar la fracción particulada en aguas para determinar la concentración total de compuestos alquilfenólicos, debido a la distribución de los compuestos más estrogénicos (nonilfenol y octilfenol) en el material particulado y la absorción en los fangos. El bioensayo RYA ha detectado una baja actividad estrogénica en las aguas superficiales, mientras que el análisis del PM en aguas residuales ha permitido obtener una mayor eliminación de la estrogenicidad (95- 97%), más importante medioambientalmente las concentraciones químicas por los potenciales efectos que puede producir en la fauna y los seres humanos. Finalmente, el desarrollo de técnicas más avanzadas para la determinación de EDCs, el aumento de publicaciones científicas, y el hecho de que los principales EDCs estudiados en esta tesis (NP, BPA, DEHP, E1, E2, E3) han sido posteriormente incluidos en la normativa europea y de USA de contaminantes prioritarios (D. 2008/105/EC, D. (UE) 2015/495/EC, Reglamento REACH y D. (UE) 2003/53/EC), ponen de manifiesto la relevancia de los compuestos estudiados.There is growing evidence that some compounds, known as endocrine-disrupting compounds (EDCs), can mimic or antagonize the actions of steroid hormones, affecting the health of humans and wildlife species by disrupting their normal endocrine function. EDCs are natural and synthetic compounds that can be found in the aquatic environment as a result of the chemical industry, pharmacy and household applications. We are exposed to mixtures of EDCs that can exert physiological effects, synergic, antagonist o additive, at very low concentrations (i.e. -estradiol and ethinylestradiol are reported to be estrogenic to fish at levels as low as 0.1 to 10 ng/L). Over the past decade there have been significant advances in our understanding of EDCs, their mechanisms of action and biological effects on human and wildlife health, suggesting a greater role for EDCs in disease than what was predicted. EDCs have Non-Monotonic Dose Response corves, they can exert effects at lower doses than expected, the moment of the exposure is critical, their effects can have latency periods and even pass to other generations. To control the endocrine disruptors, there is a need for monitoring large numbers of samples and for methodologies, not only to identify the EDCs at the low dose that they are present in the environment, but also to assess their estrogenic activity. This thesis responds to increasing concerns on this matter, providing an integrated methodology that combine analytical methods by LC-MS(MS) to determine the presence of EDCs at low concentrations in the environment, as well as biological techniques (Recombinant Yeast Assay, RYA) to assess their estrogenic activity in environmental samples. In addition, ELISA immunoassays have been validated as a screening tool for a rapid and cost-effective detection of alkylphenolic compounds in water samples in monitoring programs. Monitoring programs were performed in Portugal and the Llobregat and Ter River basins in Catalonia, Spain. Estrogenic activity was mainly attributed to alkylphenolic compounds, whereas in a few samples, the estrogens identified and confirmed by LC-MS/MS were responsible for the estrogenicity. The obtained results pointed out the importance to analyze the particulated fraction of waters to determine the total concentration of alkylphenolic compounds, due to partitioning of the most estrogenic (nonylphenol and octylphenol) upon particulate matter (PM) and enrichment in sludge. RYA showed weak estrogenic activity in surface water samples, whereas the analysis of PM in wastewaters permitted to obtain higher removal of estrogenicity (95-97%) than chemical concentrations, more important from the environmental point of view. Finally, due to their estrogenic properties, some of the EDCs studied in this thesis (i.e. Nonylphenol, DEHP, estradiol, ethinylestradiol) have been included in the European regulation (D. 2000/60/EC, D. 2008/105/EC, D. 2015/495/EC, REACH Regulation and D. 2003/53/EC) and in the US EPA priority list, confirming the relevance of the target compounds selected